विभिन्न रसायन और मीडिया एक माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में उपयोग किए जाते हैं

विभिन्न रसायन और मीडिया एक माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में उपयोग किया जाता है!

प्रयोगशाला में, बैक्टीरिया को 'मीडिया' नामक पोषक तत्वों से भरपूर पदार्थों पर उगाया जाता है। विशिष्ट उपयोगों के लिए विभिन्न प्रकार के मीडिया की भी आवश्यकता होती है।

मीडिया के घटकों को एक दिए गए अनुपात में तौला जाता है, पानी की आवश्यक मात्रा में मिलाया जाता है और आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। बैक्टीरिया को इसमें डाला जाता है और बढ़ने दिया जाता है।

मीडिया के अवयवों को तौलना एक थकाऊ काम है और कुछ अवयव अनजाने में छूट सकते हैं। इस कठिनाई को दूर करने के लिए, अब एक पाउडर के रूप में तैयार मीडिया उपलब्ध हैं।

इन मीडिया में सभी सामग्री निर्धारित अनुपात में हैं। पाउडर मीडिया की एक निश्चित मात्रा में (जैसा कि पैक के लेबल पर बताया गया है), पानी की निर्दिष्ट मात्रा को जोड़ा और निष्फल किया जाता है।

संस्कृति मीडिया निम्न प्रकार के हैं:

I. रासायनिक रूप से परिभाषित मीडिया:

रासायनिक रूप से परिभाषित मीडिया या सिंथेटिक मीडिया मीडिया है, जिसमें सभी विशिष्ट रसायनों (अणु और परमाणु) और उनकी सांद्रता निर्धारित की जा सकती है। रसायनों में H ₂ 0, NaCl, Na ₂ S0 ₄, KCI और agar शामिल हो सकते हैं। उदाहरण: अकार्बनिक सिंथेटिक शोरबा, ग्लूकोज नमक शोरबा।

द्वितीय। जटिल मीडिया:

कॉम्प्लेक्स मीडिया मीडिया है, जिसमें सभी विशिष्ट रसायनों (अणु और परमाणु) और उनकी सांद्रता निर्धारित नहीं की जा सकती है। फास्टिड बैक्टीरिया के लिए, कुछ जटिल पदार्थ, जैसे गोमांस अर्क, खमीर निकालने और पेप्टोन का उपयोग मीडिया में किया जाता है, जिनकी सटीक रासायनिक संरचना (अणु और परमाणु) काफी भिन्न होते हैं और ज्ञात नहीं होते हैं। इन मीडिया का उपयोग मुख्य रूप से बैक्टीरिया के विकास के लिए किया जाता है। उदाहरण: पोषक तत्व शोरबा और पोषक तत्व अगर।

तृतीय। विशिष्ट मीडिया:

इन मीडिया का उपयोग केवल जीवाणुओं के विकास के बजाय विशिष्ट उद्देश्यों के लिए किया जाता है।

उपयोग के उद्देश्य के आधार पर, वे निम्न प्रकार हैं:

1. चयनात्मक मीडिया:

वे सामग्री की एक विशिष्ट संरचना वाले मीडिया हैं, जो कुछ लक्ष्य जीवाणुओं के विकास का समर्थन करता है और दूसरों के विकास को रोकता है। उनका उपयोग बैक्टीरिया के विशिष्ट समूहों को अलग करने के लिए किया जाता है।

जब बैक्टीरिया का एक विशेष समूह एक चयनात्मक माध्यम में बढ़ता है, तो यह विशिष्ट कॉलोनी विशेषताओं को प्रकट करता है, जो विभिन्न नमूनों में इसकी पहचान और गणना में मदद करता है। ब्याज की विशेष बैक्टीरिया, अलग-अलग कालोनियों के रूप में पाए जाते हैं और उनकी पुष्टि के लिए आगे के परीक्षण के लिए लिया जाता है। कभी-कभी, चयनात्मक मीडिया का उपयोग अंतर मीडिया के रूप में भी किया जाता है।

चयनात्मक मीडिया के उदाहरण नीचे दिए गए हैं:

(ए) मैककॉनकी अगर:

इसका उपयोग बैक्टीरिया की ग्राम-नकारात्मक प्रजातियों को उगाने के लिए किया जाता है। माध्यम में प्रयुक्त क्रिस्टल वायलेट ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है, जबकि ग्राम-नकारात्मक प्रजातियों को बढ़ने देता है।

(बी) ईएमबी आगर:

Eosine मेथिलीन नीला अगर (ईएमबी अगर) बैक्टीरिया की ग्राम-नकारात्मक प्रजातियों को विकसित करने के लिए उपयोग किया जाता है। यह आंशिक रूप से ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है, जिसके कारण बैक्टीरिया की ग्राम-नकारात्मक प्रजातियां इसमें और अधिक गहराई से विकसित होती हैं। इसका उपयोग एंटरिक कोली फॉर्म एस्चेरिचिया कोलाई की पहचान में भी किया जाता है, जो उस पर नीले-काले रंग की कालोनियों के रूप में बढ़ता है, जिसमें धातु हरे रंग की होती है।

अन्य एंटरिक कोलीफॉर्म, जैसे कि एंटरोबैक्टर एरोजेन, उस पर मोटे, म्यूकोइड, गुलाबी कॉलोनियों के रूप में विकसित होते हैं। इन लैक्टोज़-फ़ोमेंटर्स के अलावा, लैक्टोज़-नॉन-फ़ोमेंटर्स भी इस पर बढ़ते हैं, लेकिन रंगहीन कालोनियों के रूप में, जिसके लिए वे माध्यम के बैंगनी रंग को लेते हैं।

(c) मन्नितोल नमक आगर:

इसका उपयोग स्टैफिलोकोकस एसपीपी विकसित करने के लिए किया जाता है। माध्यम में मौजूद उच्च नमक एकाग्रता (7.5% NaCl) अधिकांश अन्य जीवाणुओं के विकास को रोकता है। यह स्टैफिलोकोकस को मैनिटोल-फेरमेन्टिंग स्टैफिलोकोकस में भी अंतर करता है, जो कि कॉलोनियों के आसपास के पीले क्षेत्रों और मैनिटोल-नॉन-किण्वन स्टैफिलोकोकस के साथ बढ़ता है, जो रंग में कोई बदलाव नहीं करता है।

2. विभेदक मीडिया:

वे मीडिया हैं, जिस पर विभिन्न बैक्टीरिया कॉलोनियों के रूप में बढ़ते हैं, विभिन्न दृश्य विशेषताओं के साथ।

विभेदक मीडिया के उदाहरण नीचे दिए गए हैं:

(ए) मैककॉनकी अगर:

इस माध्यम पर, गैर-रोगजनक सामान्य आंतों के बैक्टीरिया, जो लैक्टोज-किण्वक होते हैं, लाल कॉलोनियों के रूप में बढ़ते हैं, जबकि रोगजनक आंतों के बैक्टीरिया, जो लैक्टोज-गैर-किण्वक होते हैं, रंगहीन कॉलोनियों के रूप में बढ़ते हैं।

(बी) रक्त अगर:

रक्त इस माध्यम का महत्वपूर्ण घटक है। यह स्ट्रेप्टोकोकस एसपीपी जैसे फास्टिड बैक्टीरिया के लिए एक समृद्ध घटक है।

इसका उपयोग स्ट्रेप्टोकोक्की के गुणों को अलग-अलग करने के लिए रक्त के विभिन्न प्रकार के रक्तगुल्म का उत्पादन करने के लिए किया जाता है:

(i) α- हैमोलाइसिस:

यहां, आरबीसी का आंशिक विनाश होता है, जिसके परिणामस्वरूप हीमोग्लोबिन में मेथेमोग्लोबिन की कमी के कारण कालोनियों के आसपास हरे रंग के क्षेत्र होते हैं।

(ii) β-हैमोलाइसिस:

यहां, आरबीसी का पूर्ण रक्तस्राव होता है, जिसके परिणामस्वरूप कॉलोनियों के आसपास स्पष्ट क्षेत्र होता है। इस हेमोलिसिस को दो प्रकार के हेमोलिसिन के बारे में लाया जाता है, जिसका नाम है 'स्ट्रेप्टोलिसिन ओ', जो एक एंटीजेनिक ऑक्सीजन-लैबाइल एंजाइम और 'स्ट्रेप्टोलिसिन एस' है, जो एक गैर-एंटीजेनिक ऑक्सीजन-स्थिर लाइसिन है।

(iii) वाय-हेमोलिसिस:

यहां, कोई भी हेमोलिसिस नहीं होता है, जिसके परिणामस्वरूप कॉलोनियों के आसपास कोई क्षेत्र नहीं है।

3. परिवहन मीडिया:

वे बैक्टीरिया के लघु परिवहन के लिए उपयोग किए जाने वाले मीडिया हैं, जिसके दौरान विकास अवांछनीय है। ऐसे मीडिया में केवल बफर और नमक होता है। मीडिया में C, N और अन्य वृद्धि कारकों का कोई स्रोत नहीं है। यह माइक्रोबियल विकास को रोकता है।

4. संवर्धन मीडिया:

वे मीडिया हैं, जिसमें लक्ष्य बैक्टीरिया के सापेक्ष अनुपात को समृद्ध किया जाता है, क्योंकि उनमें लक्ष्य बैक्टीरिया के लिए पोषक तत्व होते हैं, जबकि अन्य के लिए कोई नहीं। उदाहरण के लिए, फेकल पदार्थ में साल्मोनेला और शिगेला की संख्या बहुत कम होती है।

उन्हें अलग करने के लिए, उन्हें पहले सेलेनाइट शोरबा या जीएन (ग्राम-नेगेटिव) शोरबा में सुसंस्कृत किया जाता है, जिसमें केवल साल्मोनेला और शिगेला गहराई से विकसित होंगे, जबकि अन्य विकसित नहीं होंगे और अंतराल चरण में रहेंगे। फिर, यह साल्मोनेला और शिगेला के उपनिवेश प्राप्त करने के लिए ठोस मीडिया पर लकीर खींची गई है।

5. समृद्ध मीडिया:

वे मीडिया हैं जिनका उपयोग अधिकतम प्रकार के जीवाणुओं के विकास का समर्थन करने के लिए किया जाता है।

6. जैव रासायनिक मीडिया:

इन मीडिया का उपयोग बैक्टीरिया की जैव रासायनिक गतिविधियों के परीक्षण के लिए किया जाता है, जो उनकी पहचान में मदद करते हैं। विभिन्न जीवाणुओं की पहचान के लिए किए गए जैव रासायनिक परीक्षणों में प्रयुक्त महत्वपूर्ण जैव रासायनिक मीडिया की एक सूची नीचे दी गई है।