अपने आकार, आकार और व्यवस्था का निरीक्षण करने के लिए बैक्टीरिया के बुनियादी धुंधला प्रदर्शन का प्रयोग

बैक्टीरिया के सरल बुनियादी धुंधला प्रदर्शन करने के लिए, इसके आकार, आकार और व्यवस्था का निरीक्षण करने के लिए।

उद्देश्य:

मूल धुंधला द्वारा बैक्टीरिया के प्राकृतिक आकार, आकार और व्यवस्था का निरीक्षण करना संभव नहीं है, क्योंकि ये विशेषताएं गर्मी-निर्धारण द्वारा विकृत हैं।

इसके अलावा, कुछ बैक्टीरिया (जैसे स्पिरिल्ली) दाग होना मुश्किल है।

इस प्रकार, नकारात्मक धुंधलापन दो कारणों से किया जाता है:

(ए) बैक्टीरिया के प्राकृतिक आकार, आकार और व्यवस्था का निरीक्षण करने के लिए, क्योंकि यहां कोई गर्मी-निर्धारण नहीं किया जाता है।

(ख) उन जीवाणुओं का निरीक्षण करना, जिन पर दाग लगना मुश्किल है?

सिद्धांत:

जीवाणु कोशिकाएं अपनी सतह पर ऋणात्मक आवेश लेती हैं, जिसके कारण वे Na ⁺ और K ⁺ (चित्र 5.9) जैसे उद्धरणों से घिरे रहते हैं। अम्लीय धुंधला होने में, एक अम्लीय दाग का उपयोग किया जाता है, जो आयनिक क्रोमोजेन (नकारात्मक रूप से चार्ज डाई आयन) और एक कटियन में आयनित होता है।

नकारात्मक रूप से आवेशित क्रोमोजेन को बैक्टीरिया कोशिकाओं पर सतह के नकारात्मक आरोपों द्वारा निरस्त किया जाता है, जिसके कारण डाई कोशिका में प्रवेश नहीं कर पाती है। अब, रंगीन पृष्ठभूमि के खिलाफ अस्थिर कोशिकाएं आसानी से समझ में आ जाती हैं।

सामग्री की आवश्यकता:

स्लाइड, लूप, अम्लीय दाग (इओसिन / निग्रोसिन), शोरबा / प्लेट / बैक्टीरिया, माइक्रोस्कोप, विसर्जन तेल की तिरछी संस्कृति।

प्रक्रिया:

1. नल के पानी के नीचे एक स्लाइड को अच्छी तरह से साफ किया जाता है, जैसे कि पानी इसकी सतह पर बूंदों के रूप में नहीं रहता (चित्रा 5.10)।

2. पालन करने वाले पानी को बिबुलस पेपर से मिटा दिया जाता है और स्लाइड को हवा में सुखाया जाता है।

3. अम्लीय दाग (निग्रोसिन / ईोसिन) की एक छोटी बूंद को स्लाइड के एक छोर के करीब रखा जाता है।

4. एक लूप को लौ पर बाँझ कर ठंडा किया जाता है। एसेप्टिक रूप से, एगर प्लेट से बैक्टीरिया का एक लूप या तरल शोरबा से बैक्टीरिया के निलंबन का एक लूप दाग की बूंद में स्थानांतरित हो जाता है। दाग में बैक्टीरिया का एक निलंबन धीरे-धीरे दाग की बूंद में बैक्टीरिया के लूप को मिलाकर बनाया जाता है, इस तरह से, ड्रॉप फैलता नहीं है।

5. एक और साफ स्लाइड को 30 ° के कोण पर पहली स्लाइड में रखा जाता है, इस तरह से, पूर्व का एक संकीर्ण किनारा बाद में दाग की बूंद के बिना अंत की सतह को छूता है।

6. उस झुकाव वाली स्थिति में, दूसरी स्लाइड को स्टैन ड्रॉप की ओर आगे खींच दिया जाता है, जब तक कि इसके किनारे सिर्फ ड्रॉप को नहीं छूते और ड्रॉप इसके किनारे तक फैल जाता है।

7. उस झुकाव वाली स्थिति में, जीवाणुओं की एक पतली स्मीयर बनाने के लिए दूसरी स्लाइड को पीछे की ओर धकेला जाता है।

8. धब्बा हवा से सूखने वाला होता है। यहां हीट-फिक्सेशन नहीं किया जाता है।

9. स्लाइड को माइक्रोस्कोप के चरण तक ले जाया जाता है और स्मीयर को कम शक्ति और उच्च शुष्क उद्देश्यों के तहत मनाया जाता है।

10. विसर्जन तेल की एक बूंद को धब्बा पर रखा जाता है।

11. धब्बा तेल-विसर्जन उद्देश्य के तहत मनाया जाता है।