मानव जीनोम परियोजना में प्रयुक्त तकनीक

मानव जीनोम परियोजना में उपयोग की जाने वाली कुछ महत्वपूर्ण तकनीकें इस प्रकार हैं:

(ए) डीएनए सीक्वेंसिंग डीएनए के एक अणु में न्यूक्लियोटाइड आधारों-एडेनिन, गुआनिन, साइटोसिन और थाइमाइन के क्रम को निर्धारित करने के लिए अनुक्रमण विधियां हैं। मैक्सम गिल्बर्ट तकनीक के दो सामान्य तरीके हैं जो विशिष्ट आधारों पर डीएनए को टुकड़ों में विभाजित करने के लिए रसायनों का उपयोग करते हैं; या, सबसे अधिक, सेंगर तकनीक।

इसे डि-डेक्सी या चेन-टर्मिनेशन विधि भी कहा जाता है। यह डीएनए पोलीमरेज़ का उपयोग नई डीएनए श्रृंखलाएं बनाने के लिए करता है, जो कि बढ़ने के साथ-साथ चेन को रोकने के लिए डी-डीओक्सीन्यूक्लियोटाइड्स चेन टर्मिनेटरों की उपस्थिति में होता है। दोनों ही मामलों में, डीएनए के टुकड़ों को पॉलीक्रैलेमाइड जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा लंबाई के अनुसार अलग किया जाता है। यह अनुक्रम को सीधे जेल से पढ़ने में सक्षम बनाता है।

(बी) प्रतिबंध फ्रैगमेंट-लंबाई पॉलिमॉर्फिज्म (आरएफएलपी) का रोजगार।

(c) खमीर कृत्रिम क्रोमोसोम (YAC) एक वेक्टर (वाहक) है जिसे प्रयोगशाला में डीएनए के टुकड़ों को क्लोन करने के लिए बनाया और उपयोग किया जाता है। खमीर कोशिकाओं में प्रतिकृति के लिए आवश्यक टेलोमेरिक, सेंट्रोमेरिक और प्रतिकृति उत्पत्ति अनुक्रम से एक YAC का निर्माण किया जाता है। टेलोमेर क्रोमोसोम का अंत है; केन्द्रक वह क्रोमोसोम क्षेत्र है जिसमें कोशिका विभाजन के दौरान स्पिंडल फाइबर संलग्न होते हैं; और प्रतिकृति उत्पत्ति अनुक्रम धब्बे हैं जहां डीएनए की प्रतिकृति शुरू होती है।

(d) बैक्टीरियल आर्टिफिशियल क्रोमोसोम (BAC) बैक्टीरिया में क्लोन किए गए एक अन्य प्रजाति से डीएनए (100, 000-200, 000 बीपी) का एक बड़ा खंड है। विदेशी डीएनए को मेजबान बैक्टीरिया में क्लोन करने के बाद, इसकी कई प्रतियां बनाई जा सकती हैं। यह एक बड़ा सम्मिलित क्लोनिंग वेक्टर है, जो क्लोन किए गए डीएनए के बड़े खंडों को संभालने में सक्षम है, आमतौर पर लगभग 150 केबी। बीएसी को एस्चेरिचिया कोलाई के प्रयोगशाला उपभेदों में प्रचारित किया जा सकता है। ये वैक्टर जीनोम स्केलिंग अनुक्रमण परियोजनाओं के लिए जीनोमिक पुस्तकालयों के निर्माण में सहायक हैं।

(e) पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन (PCR)।

(च) वैद्युतकणसंचलन।