बैक्टीरिया की खेती के लिए आवश्यकताएं (प्रचुर मात्रा में पोषक तत्व और इष्टतम पर्यावरणीय परिस्थितियां)
बैक्टीरिया की खेती के लिए बुनियादी आवश्यकताएं हैं: (I) प्रचुर मात्रा में पोषक तत्व (II) इष्टतम पर्यावरणीय स्थिति
बैक्टीरिया लगभग हर जगह सार्वभौमिक रूप से मौजूद हैं; मिट्टी, हवा, पानी और यहां तक कि सभी जानवरों के मुंह और आंत के अंदर। Growing जीवाणुओं की खेती ’या culture बैक्टीरिया कल्चर’ का अर्थ है कि पोषक तत्वों से भरपूर पदार्थों और उपयुक्त पर्यावरणीय परिस्थितियों में इन मिनटों में अदृश्य जीवाणुओं का बढ़ना, जो उनकी तीव्र वृद्धि और गुणन का समर्थन करते हैं।
इसके परिणामस्वरूप उनकी आबादी बड़ी आबादी के रूप में दिखाई देती है जो नग्न आंखों (कॉलोनियों या अशांत निलंबन के रूप में) में दिखाई देती हैं। इस प्रकार, बैक्टीरिया की खेती के लिए दो बुनियादी आवश्यकताएं हैं, जैसे (I) प्रचुर मात्रा में पोषक तत्व और (II) इष्टतम पर्यावरणीय स्थिति।
(I) प्रचुर मात्रा में पोषक तत्व:
प्रकृति में, बैक्टीरिया उनके द्वारा उपलब्ध जटिल पोषक तत्वों को उनके द्वारा स्रावित एंजाइम द्वारा सरल रूप में क्षीण करने के बाद लेते हैं। लेकिन प्रयोगशाला में, सरल रूप में पोषक तत्वों वाले पदार्थों में उन्हें विकसित करके तेजी से विकास होता है।
तेजी से विकास और जीवाणुओं के गुणन के लिए सरल रूप में पर्याप्त मात्रा में पोषक तत्वों वाले इन पदार्थों को 'संस्कृति मीडिया' कहा जाता है। अब कई संस्कृति मीडिया उपलब्ध हैं जिनमें विभिन्न सामग्रियां हैं। संस्कृति मीडिया निम्नलिखित तीन 'भौतिक रूपों' में प्राप्त किया जाता है।
1. तरल मीडिया या शोरबा:
ये बैक्टीरिया के विकास के लिए सरल तरल रूपों में पानी और पोषक तत्व युक्त स्पष्ट तरल पदार्थ हैं, जिन्हें आटोक्लेव में निष्फल किया गया है। जब बैक्टीरिया को इनोसेक्ट किया जाता है और उनकी वृद्धि के लिए उपयुक्त परिस्थितियों में इनक्यूबेट किया जाता है, तो वे बैक्टीरिया कोशिकाओं के मोटे निलंबन में गहराई से बढ़ते हैं, जिसके कारण मीडिया अशांत हो जाता है।
2. ठोस मीडिया:
ये ठोस पदार्थ हैं, जिसमें तरल शोरबा को 1% से अधिक के स्तर पर 'अगर' नामक एक ठोस एजेंट के साथ पूरक किया गया है। अगार समुद्री शैवाल से निकाला जाने वाला पाउडर (कभी-कभी अगर कहा जाता है) एक जटिल कार्बोहाइड्रेट है जो मुख्य रूप से गैलेक्टोज से बना होता है।
यह ध्यान रखने के लिए महत्वपूर्ण है; अगर एक ठोस एजेंट है और बैक्टीरिया के लिए कोई पोषण मूल्य नहीं है। यह एक उत्कृष्ट सॉलिडाइजिंग एजेंट के रूप में कार्य करता है, जलीय घोल में यह 100 ° C पर तरलीकृत होता है और 40 ° C पर जम जाता है। मानव के अधिकांश रोगजनक बैक्टीरिया 37 ° C (सामान्य मानव शरीर के तापमान) पर उगाए जाते हैं।
आगर इस तापमान पर पिघलता नहीं है और कठोर सतह प्रदान करता है। पोषक रूप से समृद्ध इस कठोर सतह पर, प्रत्येक एकल जीवाणु बढ़ता है, गुणा करता है और उन जीवाणुओं की एक अलग कॉलोनी को जन्म देता है। तरल मीडिया में ऐसा अलगाव संभव नहीं है, जहां बैक्टीरिया निलंबन में बढ़ता है।
ठोस कृषि मीडिया को निम्नलिखित रूपों में तैयार किया जा सकता है:
(ए) आगर प्लेट्स:
1% से अधिक के स्तर पर अगर पाउडर, पूरी तरह से तरल शोरबा में गर्म करके भंग कर दिया जाता है। फिर, यह एक आटोक्लेव में निष्फल है। यह गर्म स्थिति में तरल रहता है और ठंडा होने पर जम जाता है। गर्म तरल अवस्था में, इसे निष्फल पेट्री डिश (प्रत्येक पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर) में डाला जाता है और ठंडा करने की अनुमति दी जाती है, ताकि यह पेट्री डिश के तल पर एक मोटी परत बनाता है।
ठोस पेटार मीडिया की मोटी परत वाले इन पेट्री डिशों को 'अगर प्लेट्स' या बस 'प्लेट्स' कहा जाता है। जीवाणुओं को इन प्लेटों पर उनके अलगाव और अलगाव के लिए पृथक कालोनियों के रूप में उगाया जाता है।
इन कॉलोनियों की विशेषताएं बैक्टीरिया की पहचान में भी मदद करती हैं। विभिन्न प्रायोगिक स्थितियों को पूरा करने के लिए पेट्री डिश विभिन्न आकारों में उपलब्ध हैं। हालांकि, नियमित उद्देश्यों के लिए, 15 सेमी व्यास के पेट्री डिश का उपयोग किया जाता है।
(b) आगर स्लांट्स:
1% से अधिक के स्तर पर 'अगर स्लेट्स' या बस 'स्लांट्स' तैयार करने के लिए, अगर पाउडर को पूरी तरह से तरल शोरबा में गर्म करके भंग कर दिया जाता है। गर्म तरल अवस्था में, इसे टेस्ट ट्यूब (प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में 20 मिली) में वितरित किया जाता है, कॉटन-प्लग किया जाता है और आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है।
परीक्षण ट्यूबों में निष्फल माध्यम को तिरछी स्थिति में जमने दिया जाता है, ताकि तिरछा हो सके। अगर प्लेटों में अलग-थलग पड़ने से प्राप्त जीवाणुओं की शुद्ध स्टॉक संस्कृतियों के रखरखाव के लिए तिरछा का उपयोग किया जाता है।
इनका उपयोग अंतर्राष्ट्रीय मानक प्रयोगशालाओं से प्राप्त मानक संदर्भ स्टॉक संस्कृतियों के रखरखाव के लिए भी किया जाता है। शुद्ध संस्कृतियों और मानक संस्कृतियों को समय-समय पर (आमतौर पर 15 दिन से 1 महीने तक) बनाए रखा जाता है, ताजा रूप से तिरछी जगहों पर स्थानांतरित किया जाता है। तिरछा होने पर वृद्धि की विशेषता भी बैक्टीरिया की पहचान में मदद करती है।
(c) आगर डीप ट्यूब:
अग्र गहरी नलियों को उसी प्रक्रिया का पालन करते हुए तैयार किया जाता है, जैसा कि अगर स्टर की तैयारी के दौरान किया जाता है, तो यहां, नसबंदी के बाद मीडिया को, ईमानदार स्थिति में जमने दिया जाता है। ये मुख्य रूप से बैक्टीरिया की गैसीय आवश्यकताओं के अध्ययन के लिए उपयोग किए जाते हैं।
3. अर्ध ठोस मीडिया:
उनमें 1% से कम स्तर पर अगर शामिल होते हैं, ताकि वे एक अर्धनिर्मित अवस्था में रहें। उनका उपयोग विशिष्ट अध्ययनों के लिए किया जाता है।
(II) इष्टतम पर्यावरण की स्थिति:
कई पर्यावरणीय स्थिति बैक्टीरिया के विकास को प्रभावित करती हैं। एक बैक्टीरिया की खेती करने के लिए, इसे इष्टतम पर्यावरणीय परिस्थितियों के एक सेट के साथ प्रदान किया जाना चाहिए। बैक्टीरिया की खेती के दौरान प्रदान की जाने वाली सबसे महत्वपूर्ण पर्यावरणीय स्थिति नीचे दी गई है।
1. मीडिया का पीएच:
बैक्टीरिया की प्रत्येक प्रजाति एक विशिष्ट पीएच रेंज के भीतर विकसित हो सकती है। अधिकांश बैक्टीरिया के लिए यह सीमा 4 से 9 के बीच होती है। हालांकि, बैक्टीरिया की प्रत्येक प्रजाति की अधिकतम वृद्धि बहुत ही सीमित पीएच सीमा के भीतर होती है। अधिकांश बैक्टीरिया के लिए यह इष्टतम पीएच रेंज 6.5-7.5 है और अधिकांश कवक के लिए, मोल्ड और खमीर 4-6 हैं, क्योंकि वे अम्लीय वातावरण पसंद करते हैं।
अधिकतम वृद्धि होने के लिए, संस्कृति मीडिया के पीएच को इसकी तैयारी के दौरान इस पीएच में समायोजित किया जाना चाहिए। रासायनिक पदार्थ जो बफ़र्स के रूप में कार्य करते हैं (उदाहरण केएच 2 पी 0 4, के 2 एचपी 4 4 ) को पीएच में किसी भी बदलाव को रोकने के लिए मीडिया में जोड़ा जाता है जो कि उनके विकास के दौरान बैक्टीरिया द्वारा उत्पादित अम्लीय या बुनियादी चयापचय अंत उत्पादों के संचय के कारण हो सकता है। ।
2. ऊष्मायन का तापमान:
मेसोफाइल 37 डिग्री सेल्सियस, 55 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोफिल्स और 4 डिग्री सेल्सियस पर साइकोफाइल्स से ऊष्मायन किया जाता है।
