नाइट्रेट को कम करने की क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर नाइट्रेट न्यूनीकरण टेस्ट

नाइट्रेट को कम करने की उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर नाइट्रेट कमी परीक्षण के प्रदर्शन के बारे में जानने के लिए इस लेख को पढ़ें!

सिद्धांत:

कुछ बैक्टीरिया नाइट्रेट को कम करने की क्षमता रखते हैं, क्योंकि वे एंजाइम 'नाइट्रेट रिडक्टेस' का उत्पादन कर सकते हैं।

यह एंजाइम, उपयुक्त इलेक्ट्रॉन दाता की उपस्थिति में, नाइट्रेट्स (N0 ₃ ^- ) से नाइट्राइट्स (N0 ₂ ^- ) को कम कर देता है। N0 ₂ की उपस्थिति ^- सल्फैलिक एसिड और ए-नेफ्थाइलमाइन द्वारा इंगित की जाती है, जो रंग को लाल रंग में बदल देती है।

नाइट्रेट कमी परीक्षण में, परीक्षण बैक्टीरिया को नाइट्रेट युक्त शोरबा माध्यम में उगाया जाता है (N0 ₃ ^- )। यदि बैक्टीरिया में नाइट्रेट को कम करने की क्षमता है, तो शोरबा सल्फाइक्लिक एसिड और ए-नेफथाइलमाइन के अलावा एक लाल रंग का अधिग्रहण करता है।

यदि लाल रंग का उत्पादन नहीं किया जाता है, तो यह इंगित करता है कि या तो N0 ₃ ^- बैक्टीरिया द्वारा बिल्कुल भी कम नहीं किया गया है या बैक्टीरिया अत्यधिक शक्तिशाली नाइट्रेट रिडक्टेस एंजाइम का उत्पादन करता है, जो N0 _{3 को} तेजी से कम करता है ^- N0 ₂ से परे ^- NH ₃ और N _{2 तक} । इसकी पुष्टि करने के लिए, जस्ता धूल की एक छोटी मात्रा को जोड़ा जाता है, जो NO _{3 को} कम करता है ^- यदि माध्यम में उपलब्ध है, तो N0 ₂ ^-, जिससे लाल रंग का उत्पादन होता है।

इस प्रकार, यदि लाल रंग का उत्पादन होता है, तो यह इंगित करता है कि N0 ₃ ^- मध्यम अपरिवर्तित में मौजूद है और बैक्टीरिया में नाइट्रेट को कम करने की क्षमता नहीं है। यदि लाल रंग का उत्पादन नहीं होता है, तो यह इंगित करता है कि, N0 ₃ ^- को N0 ₂ से कम कर दिया गया है ^- NH ₃ और N _{2 को} और बैक्टीरिया में नाइट्रेट को कम करने की क्षमता है।

सामग्री की आवश्यकता:

टेस्ट ट्यूब, शंक्वाकार फ्लास्क, कॉटन प्लग, इनोक्युलेटिंग लूप, आटोक्लेव, बन्सन बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोजल जार, इनक्यूबेटर, नाइट्रेट ब्रोथ, जिंक डस्ट, नाइट्रेट रीएजेंट सॉल्यूशन ए, नाइट्रेट अभिकर्मक सॉल्यूशन बी, पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों।

प्रक्रिया:

1. नाइट्रेट शोरबा माध्यम की सामग्री (मुख्य घटक के रूप में नाइट्रेट युक्त) या इसके तैयार किए गए पाउडर को शोरबा के 100 मिलीलीटर के लिए आवश्यक तौला और भंग किया जाता है और 250 मिलीलीटर शंक्वाकार फ्लास्क में आसुत जल के 100 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है ( चित्रा 7.10)।

2. इसका पीएच एक पीएच पेपर या पीएच मीटर का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है और यदि यह कम है, तो 0.1N HCI का उपयोग करते हुए इसे 0.1N HCI का उपयोग करके 7.2 पर समायोजित किया जाता है। कुप्पी को गर्म किया जाता है, यदि आवश्यक हो, तो सामग्री को पूरी तरह से भंग करने के लिए।

3. शोरबा को पांच परीक्षण ट्यूबों (लगभग 10 मिलीलीटर प्रत्येक), कपास-प्लग में बांटा गया है, शिल्प कागज के साथ कवर किया गया है और धागे या रबर बैंड के साथ बांधा गया है।

4. शोरबा ट्यूबों को आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस (15 साई दबाव) पर निष्फल किया जाता है।

5. शोरबा ट्यूबों को कमरे के तापमान तक ठंडा करने की अनुमति है।

6. परीक्षण बैक्टीरिया को असंगत रूप से टीका लगाया जाता है, अधिमानतः एक लामिना का प्रवाह कक्ष में, बन्सेन लौ के ऊपर निष्फल लूप की मदद से शोरबा में। लूप को प्रत्येक इनोक्यूलेशन के बाद निष्फल किया जाता है।

7. एक इनक्यूबेटर में 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनोकेटेड शोरबा ट्यूबों को ऊष्मायन किया जाता है।

8. नाइट्रेट अभिकर्मक समाधान ए (सल्फेनिक एसिड युक्त) और नाइट्रेट अभिकर्मक समाधान बी (एक नेफथाइलमाइन युक्त) के प्रत्येक 0.5 मिलीलीटर को प्रत्येक परीक्षण ट्यूब में जोड़ा जाता है, अच्छी तरह से हिलाया जाता है और 15 मिनट के बाद रंग परिवर्तन देखा जाता है।