अपने प्राकृतिक आकार और आकार को देखने के लिए बैक्टीरिया के गीले पर्वत की तैयारी
अपने प्राकृतिक आकार, आकार और रहने की स्थिति में व्यवस्था का अवलोकन करने के लिए, बैक्टीरिया का गीला माउंट तैयार करना।
उद्देश्य:
बैक्टीरिया की कोशिकाओं को दाग द्वारा रंगे जाने पर आसानी से और स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है, लेकिन ज्यादातर धुंधला प्रक्रियाओं में, कोशिकाएं मर जाती हैं और अपने प्राकृतिक आकार और आकार को गर्मी-निर्धारण के साथ-साथ रसायनों (दाग, एसिड और एसिड) के संपर्क के कारण खो देती हैं। शराब)।
इस प्रयोग का उद्देश्य जीवित अवस्था में जीवाणुओं के प्राकृतिक आकार, आकार और व्यवस्था का निरीक्षण करना है। वेट माउंट में मोटिवेशन नहीं देखा जा सकता है, क्योंकि सेल को स्लाइड और कवर स्लिप के बीच दबाया जाता है।
सिद्धांत:
गीले माउंट में, बैक्टीरिया के निलंबन की एक बूंद को एक स्लाइड पर रखा जाता है, एक कवर पर्ची के साथ कवर किया जाता है और एक यौगिक माइक्रोस्कोप के तहत या अधिमानतः एक अंधेरे क्षेत्र या चरण-विपरीत माइक्रोस्कोप के तहत तेल-विसर्जन उद्देश्य का उपयोग करके देखा जाता है।
सामग्री की आवश्यकता:
ग्लास स्लाइड, कवर स्लिप, पेट्रोलियम जेली, विसर्जन तेल (देवदार ऊन तेल या तरल पैराफिन), बैक्टीरिया संस्कृति (ठोस माध्यम पर या तरल निलंबन में), लूप और माइक्रोस्कोप (यौगिक, अंधेरे-क्षेत्र या चरण- विपरीत)।
प्रक्रिया:
1. नल के पानी के नीचे एक स्लाइड को अच्छी तरह से साफ किया जाता है, जैसे कि पानी उसकी सतह पर बूंदों के रूप में नहीं रहता (चित्र 5.2)।
2. स्लाइड को बिबुलस पेपर से पोंछकर और बाद में आंच पर या धूप में रखकर सुखाया जाता है।
3. यदि बैक्टीरिया को ठोस माध्यम (तिरछी संस्कृति या प्लेट कल्चर) पर उगाया गया है, तो आसुत जल की एक बूंद स्लाइड के केंद्र में डाल दी जाती है। एक लूप को लाल गर्म करने के लिए एक लौ पर गर्म करके निष्फल किया जाता है। इसे कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है। फिर, aseptically बैक्टीरिया संस्कृति का एक छोटा सा हिस्सा लूप द्वारा स्क्रैप किया जाता है और पानी की बूंद में स्थानांतरित किया जाता है।
बैक्टीरिया का एक सस्पेंशन धीरे-धीरे बैक्टीरिया के लूप को पानी की बूंद में मिलाकर बनाया जाता है, इस तरह से, बूंद फैलती नहीं है। यदि निलंबन के रूप में एक तरल माध्यम में उगाया जाता है, तो आमतौर पर बैक्टीरिया निलंबन की एक बूंद को एक लौ-निष्फल लूप का उपयोग करके सीधे स्लाइड के केंद्र में रखा जाता है।
4. पेट्रोलियम जेली या इसी तरह की सामग्री को बूंद के आसपास लगाया जाता है, ताकि, जब कवर स्लिप ड्रॉप को कवर करे, तो वाष्पीकरण और वायु प्रवाह का प्रभाव कम से कम हो।
5. स्लाइड को छूने वाले एक किनारे के साथ बैक्टीरिया के निलंबन की बूंद के पास एक कवर स्लिप को तिरछी स्थिति में रखा जाता है।
6. धीरे-धीरे कवर स्लिप को कम किया जाता है, जब तक कि यह ड्रॉप की सतह को नहीं छूता।
7. फिर, कवर स्लिप जारी की जाती है, ताकि कवर सस्पेंशन के तहत सभी दिशाओं में बैक्टीरिया के निलंबन की बूंद फैल जाए। देखभाल की जानी चाहिए, ताकि निलंबन में कोई हवा का बुलबुला न बने।
8. स्लाइड को एक यौगिक माइक्रोस्कोप के मंच पर क्लिप किया जाता है और कम शक्ति और उच्च शुष्क उद्देश्यों का उपयोग करके देखा जाता है। फिर, विसर्जन तेल की एक बूंद को कवर स्लिप पर रखा जाता है और माइक्रोस्कोप के तेल-विसर्जन उद्देश्य का उपयोग करके देखा जाता है। अधिमानतः, स्पष्ट अवलोकन के लिए एक चरण-कंट्रास्ट या डार्क-फील्ड माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाना चाहिए।
अवलोकन (तेल-विसर्जन उद्देश्य के तहत):
1. बैक्टीरिया का आकार:
गोलाकार (कोकस)
रॉड के आकार का (बेसिली)
2. बैक्टीरिया की व्यवस्था:
कोमा जैसा (वाइब्रियो)
सर्पिल (स्पाइरोकेट्स)
जोड़े (डिप्लोबैसिलस / डिप्लोकॉकस)
चौपायों (टेट्राड्स) में
जंजीरों में (स्ट्रेप्टोकोकस / स्ट्रेप्टोबैसिलस)
अंगूर की तरह गुच्छे (स्टेफिलोकोकस)
क्यूबॉइडल (सार्सिना या ऑक्टेट)
3. बैक्टीरिया का आकार:
आंखों के आकलन से, तेल-विसर्जन उद्देश्य के तहत क्षेत्र की ड्राइंग बनाएं।