फेनिलएलनिन बैक्टीरिया पर अमीनो एसिड (चित्रा के साथ) को निष्क्रिय करने की उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए जीवाणुरोधी परीक्षण

अमीनो एसिड को कम करने की उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर फेनिलएलनिन डेमिनीज टेस्ट के बारे में जानने के लिए इस लेख को पढ़ें!

सिद्धांत:

कुछ बैक्टीरिया में अमीनो एसिड फेनिलएलनिन को कम करने की क्षमता होती है, क्योंकि वे एंजाइम 'फेनिलएलनिन डेमिनमिन' का उत्पादन कर सकते हैं।

यह एंजाइम अपने अमीनो समूह को हटाकर फेनिलएलनिन को बहरा बना देता है, जिससे फेनिलफ्रुविक एसिड (कीटो एसिड) और अमोनिया (एनएच ₃ ) का उत्पादन होता है। फेनिलफ्रुविक एसिड फेरिक क्लोराइड के घोल से हरा रंग बनाता है।

फेनिलएलनिन डेमिनमिनस टेस्ट में, फेनिलएलनिन युक्त अगर स्लाटरों पर टेस्ट जीवाणु को उगाया जाता है। यदि बैक्टीरिया में फेनिलएलनिन को कम करने की क्षमता होती है, तो उस पर फेरिक क्लोराइड के घोल को गिराने पर तिरछे रंगों का रंग पीला से हरा हो जाता है।

सामग्री की आवश्यकता:

टेस्ट ट्यूब, शंक्वाकार फ्लास्क, कॉटन प्लग, इनोकुलेटिंग लूप, आटोक्लेव, बन्सन बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोजल जार, इनक्यूबेटर, फेनिलएलनिन अगर, फेरिक क्लोराइड सॉल्यूशन (10%), पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों।

प्रक्रिया:

1. फेनिलएलनिन अगर माध्यम की सामग्री (मुख्य घटकों के रूप में फेनिलएलनिन युक्त) या इसके तैयार किए गए पाउडर को माध्यम के 100 मिलीलीटर के लिए आवश्यक तौला और 250 मिलीलीटर आसुत जल में 100 मिलीलीटर आसुत जल में हिलाकर और घुमाकर तौला जाता है ( चित्र 7.17)।

2. इसका पीएच एक पीएच पेपर या पीएच मीटर का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है और यदि यह कम है, तो 0.1N HCI का उपयोग करते हुए इसे 0.1N HCI का उपयोग करके 7.2 पर समायोजित किया जाता है।

3. पूरी तरह से मध्यम में अगर को भंग करने के लिए फ्लास्क को गरम किया जाता है।

4. इससे पहले कि यह जम जाए, गर्म पिघली हुई स्थिति में माध्यम को 5 टेस्ट ट्यूब (लगभग 20 मिलीलीटर प्रत्येक) में वितरित किया जाता है।

5. परखनली सूती-प्लग वाली होती हैं, जिन्हें क्राफ्ट पेपर से ढका जाता है और धागे या रबर बैंड से बांधा जाता है।

6. वे आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 ° C (15 psi दबाव) पर निष्फल होते हैं।

7. नसबंदी के बाद, उन्हें आटोक्लेव से निकाल दिया जाता है और मध्यम और ठंडा करने के लिए एक तिरछी स्थिति में रखा जाता है, ताकि फेनिलएलनिन एगर तिरछा हो सके।

8. परीक्षण बैक्टीरिया को असमान रूप से, अधिमानतः लामिना का प्रवाह कक्ष में, एक लौ-निष्फल लूप की मदद से तिरछी सतह पर टकराकर निष्क्रिय किया जाता है। लूप को प्रत्येक इनोक्यूलेशन के बाद निष्फल किया जाता है।

9. एक इनक्यूबेटर में 24 से 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनोकेटेड तिरछा ऊष्मायन किया जाता है।

10. फेरिक क्लोराइड के घोल की 4-5 बूंदें (10%) प्रत्येक तिरछी में डाली जाती हैं।