हाइड्रोजन के लिए हाइड्रोजन सप्लीमेंट टेस्ट बैक्टीरिया का उत्पादन करने की उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए (चित्रा के साथ)

हाइड्रोजन का उत्पादन करने की उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर परीक्षण किए गए हाइड्रोजन के बारे में जानने के लिए इस लेख को पढ़ें!

सिद्धांत:

कुछ बैक्टीरिया सल्फर को हाइड्रोजन सल्फाइड को कम करने की क्षमता रखते हैं। यह एक रंगहीन गैस है, जो लौह सल्फाइड के लौह अवक्षेप के उत्पादन के लिए लौह (लौह लवण) के साथ प्रतिक्रिया करती है।

यह लेड एसीटेट के साथ भी प्रतिक्रिया करता है जिससे लेड सल्फाइड के काले अवक्षेप बनते हैं। सल्फर के स्रोत के आधार पर हाइड्रोजन सल्फाइड टेस्ट (एच, एस टेस्ट) दो तरीकों से किया जा सकता है।

वे इस प्रकार हैं:

(मैं) सल्फर के अकार्बनिक स्रोत का उपयोग करके एच ₂ एस परीक्षण

(Ii) सल्फर के कार्बनिक स्रोत का उपयोग करके एच ₂ एस परीक्षण

(i) सल्फर के अकार्बनिक स्रोत का उपयोग करके एच ₂ एस टेस्ट:

इस परीक्षण में, टेस्ट बैक्टीरिया को ट्रिपल शुगर आयरन एगर स्लेंट्स (TSI agar slants) पर उगाया जाता है, जिसमें ग्लूकोज, सुक्रोज, लैक्टोज, फिनोल रेड, सोडियम थायोसल्फेट और फेरस सल्फेट होते हैं। यदि जीवाणु माध्यम में उपयोग किए जाने वाले अकार्बनिक सल्फर (सोडियम थायोसल्फेट) का उपयोग करता है, तो एच ₂ एस का उत्पादन होता है, जो कि फेरस सल्फेट के साथ मिलकर फेरस सल्फाइड के काले अवक्षेप बनाता है, जिसके परिणामस्वरूप बट का रंग काला हो जाता है। ।

अकार्बनिक सल्फर का उपयोग करने के अलावा, यदि जीवाणु तीन शर्करा (ग्लूकोज, सूक्रोज या लैक्टोज) में से किसी का उपयोग कर सकते हैं, तो एसिड का उत्पादन होता है, जो माध्यम के पीएच को कम करता है। नतीजतन, तिरछा का रंग लाल से पीले रंग में बदल जाता है।

सामग्री की आवश्यकता:

टेस्ट ट्यूब, शंक्वाकार फ्लास्क, कॉटन प्लग, इनोक्युलेटिंग सुई, आटोक्लेव, बन्सन बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोजल जार, इनक्यूबेटर, ट्रिपल शुगर आयरन एगर (टीएसआई आगर) पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियां।

प्रक्रिया:

1. टीएसआई अगर माध्यम की सामग्री (मुख्य घटकों के रूप में 3 शक्कर और लोहे से युक्त) या इसके तैयार किए गए पाउडर को माध्यम के 100 मिलीलीटर के लिए आवश्यक तौला जाता है और 250 मिलीलीटर शंक्वाकार फ्लास्क में आसुत जल के 100 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है। मिलाते हुए और घूमता (चित्रा 7.13)।

2. इसका पीएच एक पीएच पेपर या पीएच मीटर का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है और 0.1N HCI का उपयोग करके 7.4 से समायोजित किया जाता है यदि यह कम है या 0.1N NaOH का उपयोग कर रहा है यदि यह कम है।

3. पूरी तरह से मध्यम में अगर को भंग करने के लिए फ्लास्क को गरम किया जाता है।

4. इससे पहले कि यह जम जाए, गर्म पिघली हुई स्थिति में माध्यम को 5 टेस्ट ट्यूब (लगभग 20 मिलीलीटर प्रत्येक) में वितरित किया जाता है।

5. परखनली सूती-प्लग वाली होती हैं, जिन्हें क्राफ्ट पेपर से ढका जाता है और धागे या रबर बैंड से बांधा जाता है।

6. वे आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस (15 पीएसआई दबाव) पर निष्फल होते हैं।

7. नसबंदी के बाद, उन्हें आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और मध्यम और ठंडा करने के लिए तिरछी स्थिति में रखा जाता है, ताकि टीएसआई एगर तिरछा हो सके।

8. परीक्षण बैक्टीरिया को असमान रूप से टीका लगाया जाता है, अधिमानतः एक लामिना का प्रवाह कक्ष में, बट में चाकू मारकर और एक लौ- निष्फल सुई की मदद से तिरछी सतह पर टकराकर। प्रत्येक टीका के बाद सुई को निष्फल कर दिया जाता है।

9. एक इनक्यूबेटर में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनोलेटेड तिरछी ऊष्मायन किया जाता है।

टिप्पणियों:

1. बट का रंग बदलकर काला हो जाता है: H ₂ S धनात्मक।

2. बट का रंग काला नहीं बदलता है: एच ₂ एस नकारात्मक।

(ii) एच ₂ एस टेस्ट सल्फर के कार्बनिक स्रोत का उपयोग कर

इस परीक्षण में, टेस्ट बैक्टीरिया को सिस्टीन शोरबा में उगाया जाता है, जिसमें सल्फर के कार्बनिक स्रोत के रूप में सिस्टीन होता है। यदि जीवाणु माध्यम में प्रयुक्त कार्बनिक सल्फर (सिस्टीन) का उपयोग अपने एंजाइम ul सिस्टीन डेसल्फ्यूरस ’की मदद से करता है, तो एच ₂ एस का उत्पादन होता है। यह H ₂ S लेड एसिटेट के साथ मिलकर एक पेपर में भिगोया जाता है जिससे लेड सल्फाइड के काले अवक्षेप बन जाते हैं जिसके परिणामस्वरूप पेपर स्ट्रिप का रंग बदलकर काला हो जाता है।

सामग्री की आवश्यकता:

टेस्ट ट्यूब, शंक्वाकार फ्लास्क, कॉटन प्लग, इनोक्युलेटिंग लूप, आटोक्लेव, बन्सन बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोजल जार, इनक्यूबेटर, सिस्टीन ब्रोथ, व्हामन फिल्टर पेपर स्ट्रिप्स, लीड एसीटेट सॉल्यूशन (संतृप्त), पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों।

प्रक्रिया:

1. सिस्टीन शोरबा माध्यम की सामग्री (मुख्य घटक के रूप में सिस्टीन युक्त) या शोरबा के 100 मिलीलीटर के लिए आवश्यक इसके तैयार पाउडर को तौला जाता है और झटके और घूमता (250 मिलीलीटर शंकुधारी कुप्पी में आसुत जल के 100 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है) चित्र 7.14)।

2. इसका पीएच एक पीएच पेपर या पीएच मीटर का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है और 0.1N HCI का उपयोग करके 7.5 से समायोजित किया जाता है यदि यह अधिक है या 0.1N NaOH का उपयोग कर रहा है यदि यह कम है। कुप्पी को गर्म किया जाता है, यदि आवश्यक हो, तो सामग्री को पूरी तरह से भंग करने के लिए।

3. शोरबा को पांच परीक्षण ट्यूबों (लगभग 10 मिलीलीटर प्रत्येक), कपास-प्लग में बांटा गया है, शिल्प कागज के साथ कवर किया गया है और धागे या रबर बैंड के साथ बांधा गया है।

4. शोरबा ट्यूबों को आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस (15 साई दबाव) पर निष्फल किया जाता है।

5. शोरबा ट्यूबों को कमरे के तापमान तक ठंडा करने की अनुमति है।

6. परीक्षण बैक्टीरिया को असंगत रूप से टीका लगाया जाता है, अधिमानतः एक लामिना का प्रवाह कक्ष में, बन्सेन लौ के ऊपर निष्फल लूप की मदद से शोरबा में। लूप को प्रत्येक इनोक्यूलेशन के बाद निष्फल किया जाता है।

7. लीड एसीटेट समाधान (संतृप्त) में भिगोए गए कागज की एक छोटी पट्टी प्रत्येक टेस्ट ट्यूब के मुंह पर इस तरह से तय की जाती है कि इसका एक लंबा हिस्सा टेस्ट ट्यूब के अंदर रहता है और एक छोटा हिस्सा बाहर रहता है।

8. इनक्यूबेटेड शोरबा ट्यूबों को एक इनक्यूबेटर में 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।