बैक्टीरिया पर Coagulase टेस्ट को-ब्लड (चित्रा के साथ) जमा करने की उनकी क्षमताओं का पता लगाने के लिए

बैक्टीरिया पर Coagulase टेस्ट को-ब्लड (चित्रा के साथ) जमा करने की उनकी क्षमताओं का पता लगाने के लिए!

सिद्धांत:

बैक्टीरिया के रोगजनक उपभेदों स्टैफिलोकोकस में एंजाइम कोगुलेज़ होता है, जो फाइब्रिनोजेन को फाइब्रिन में बदलने के लिए मेजबान ऊतकों के भीतर कार्य करता है।

जो फाइब्रिन मेशवर्क बनता है, वह बैक्टीरिया कोशिकाओं या संक्रमित ऊतकों को घेरता है, गैर-विशिष्ट मेजबान प्रतिरोध तंत्र, जैसे कि फागोसाइटोसिस और सामान्य सीरम की एंटी-स्टैफिलोकोकल गतिविधि से बैक्टीरिया की रक्षा करता है।

यह एंजाइम थ्रोम्बिन जैसे पदार्थ का अग्रदूत होने के कारण मेजबान में रक्त के जमावट में भी मदद करता है, जो रक्त को जमाता है या जमाता है। Coagulase पॉजिटिव (रोगजनक या विषाणुजन्य) और Coagulase नकारात्मक (गैर-रोगजनक या avirulent) Staphylococcus के बीच अंतर करने के लिए कोएगुलस परीक्षण किया जाता है।

कोगुलेज़ परीक्षण में, स्टैफिलोकोकस की परीक्षण प्रजातियों के एक निलंबन को रक्त प्लाज्मा के साथ मिलाया जाता है और इनकोलेटेड प्लाज्मा को समय-समय पर फाइब्रिन के गठन या जमावट के लिए जांच की जाती है।

चार घंटे के भीतर थक्का बनने की व्याख्या एक सकारात्मक परिणाम और एक पौरूष (रोगजनक) स्टैफिलोकोकस तनाव के संकेत के रूप में की जाती है। ऊष्मायन के 24 घंटों के बाद जमावट की अनुपस्थिति एक नकारात्मक परिणाम है, एक पौरूष (गैर-रोगजनक) तनाव का संकेत है।

सामग्री की आवश्यकता:

प्रयोगशाला पशु (खरगोश या गिनी पिग), सिरिंज, थक्कारोधी (सोडियम साइट्रेट या हेपरिन), रक्त संग्रह ट्यूब, सेंट्रीफ्यूज, टेस्ट ट्यूब, स्लाइड, इनोक्युलेटिंग लूप, बन्स बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोजल जार, पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों। जीनस स्टैफिलोकोकस की।

प्रक्रिया:

1. सिरिंज और रक्त संग्रह ट्यूबों को सोडियम साइट्रेट या हेपरिन के समाधान से धोया जाता है, ताकि संग्रह के तुरंत बाद रक्त के थक्के को रोकने के लिए (चित्रा 7.24)।

2. सिरिंज की मदद से, खरगोश या गिनी पिग जैसे प्रयोगशाला जानवरों से रक्त एकत्र किया जाता है और संग्रह ट्यूबों में डाल दिया जाता है।

3. एक अपकेंद्रित्र में 15 मिनट के लिए 3000 आरपीएम पर रक्त को अपकेंद्रित किया जाता है।

4. सतह पर तैरनेवाला (प्लाज्मा) एक और साइट्रेट युक्त परखनली में एकत्रित हो जाता है और अवशेषों (रक्त कोशिकाओं) को त्याग दिया जाता है।

(ए) स्लाइड विधि:

1. जीनस स्टैफिलोकोकस से संबंधित टेस्ट बैक्टीरिया के निलंबन की दो बूंदों को एक इनोक्युलेटिंग लूप की मदद से स्लाइड के दो समान रूप से विभाजित हिस्सों पर रखा जाता है। एक बूंद का उपयोग 'नियंत्रण' के रूप में किया जाता है, यह देखने के लिए कि जीवाणु स्वयं क्लंप में हैं और दूसरी बूंद का उपयोग 'परीक्षण' के रूप में किया जाता है।

2. 'टेस्ट ड्रॉप' में, एकत्रित प्लाज्मा की एक बूंद को मिलाया जाता है, मिश्रित और कमरे के तापमान पर जोड़ा जाता है।

3. बूँदें 4 घंटे तक प्रति घंटे के अंतराल पर देखी जाती हैं।

(बी) ट्यूब विधि:

1. दो छोटे टेस्ट ट्यूब लिए जाते हैं। एक टेस्ट ट्यूब को 'टेस्ट' और दूसरे को 'कंट्रोल' के रूप में चिह्नित किया जाता है। प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में, 0.5 मिली बैक्टीरिया का निलंबन लिया जाता है।

2. 'टेस्ट' ट्यूब में, 1 मिलीलीटर प्लाज्मा जोड़ा जाता है, मिश्रित और ऊष्मायन किया जाता है

3. ट्यूब 4 घंटे तक प्रति घंटे के अंतराल पर देखे जाते हैं।

टिप्पणियों:

1. गुच्छे बनते हैं: कोगुलस पॉजिटिव स्टैफिलोकोकस।

2. गुच्छे नहीं बनते हैं: कोगुलस नकारात्मक स्टैफिलोकोकस।