किण्वन कार्बोहाइड्रेट के लिए उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर कार्बोहाइड्रेट किण्वन टेस्ट

किण्वन कार्बोहाइड्रेट के लिए उनकी क्षमता का पता लगाने के लिए बैक्टीरिया पर कार्बोहाइड्रेट किण्वन टेस्ट!

सिद्धांत:

कुछ बैक्टीरिया में कार्बोहाइड्रेट, विशेष रूप से शर्करा को किण्वित करने की क्षमता होती है। उनमें से, प्रत्येक बैक्टीरिया केवल कुछ शर्करा को किण्वित कर सकता है, जबकि यह दूसरों को किण्वित नहीं कर सकता है।

इस प्रकार, शर्करा, जो एक बैक्टीरिया किण्वित कर सकती है और शर्करा, जो यह बैक्टीरिया की विशेषता नहीं है।

कार्बोहाइड्रेट किण्वन परीक्षण का परीक्षण अलग से किया जाता है, शर्करा, ग्लूकोज, सूक्रोज, लैक्टोज, माल्टोज़ और ज़ाइलोज़ जैसे शर्करा को किण्वित करने की क्षमता के साथ-साथ उनके मादक डेरिवेटिव जैसे एस्कुलिन, सैलिसिन, एडोनिटोल, डल्सीटोल और सोर्बिटोल। यदि जीवाणु एक चीनी या चीनी व्युत्पन्न को किण्वित कर सकते हैं, तो एसिड का उत्पादन होता है, जो ब्रोमोकेरसोल बैंगनी के रंग को बैंगनी से पीले रंग में बदल देता है।

इसके अलावा, अगर यह एक 'एरोजेनिक बैक्टीरिया' है, तो एसिड और गैस (C0 ₂ ) दोनों का उत्पादन होता है, जबकि अगर यह aanerogenic बैक्टीरिया है, तो केवल एसिड बिना किसी गैस के उत्पन्न होता है। गैस का उत्पादन एक उल्टे डरहम ट्यूब (एक लघु परीक्षण ट्यूब) में बुलबुले के रूप में इसके संचय द्वारा इंगित किया गया है।

कार्बोहाइड्रेट किण्वन परीक्षण में, टेस्ट बैक्टीरिया को शोरबा माध्यम में उगाया जाता है जिसमें शर्करा या शुगर डेरिवेटिव और ब्रोमोकेरसोल बैंगनी होते हैं। एक उल्टे डरहम ट्यूब को इसमें डूबा रखा जाता है।

यदि बैक्टीरिया में शर्करा या चीनी व्युत्पन्न को किण्वित करने की क्षमता है, तो शोरबा का रंग बैंगनी से पीले रंग में बदल जाता है। अगर गैस संचय को डरहम ट्यूब में बुलबुले के रूप में देखा जाता है, तो यह एक अम्लीय बैक्टीरिया है, जबकि अगर कोई गैस संचय नहीं देखा जाता है, तो यह एक एनारोजेनिक बैक्टीरिया है।

सामग्री की आवश्यकता:

टेस्ट ट्यूब, डरहम ट्यूब, शंक्वाकार फ्लास्क, कॉटन प्लग, इनोकुलेटिंग लूप, आटोक्लेव, बन्सन बर्नर, लैमिनर फ्लो चैंबर, डिस्पोज़ जार, इनक्यूबेटर, कार्बोहाइड्रेट ब्रोथ (विशिष्ट चीनी या ग्लूकोज, सुक्रोज, लैक्टोज, माल्टोज़, जाइलोज़ जैसे शुगर डेरिवेटिव युक्त शोरबा), एस्कुलिन, सैलिसिन, एडोनिटोल, डल्सीटॉल, सोर्बिटोल आदि), पृथक कालोनियों या बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों।

प्रक्रिया:

1. कार्बोहाइड्रेट ब्रोथ मीडियम (मुख्य घटकों के रूप में आवश्यक कार्बोहाइड्रेट और ब्रोमोकेरसोल बैंगनी युक्त) या शोरबा के 100 मिलीलीटर के लिए आवश्यक इसके तैयार पाउडर को 250 मिलीलीटर शंक्वाकार फ्लास्क में 100 मिलीलीटर आसुत जल में तौला और भंग किया जाता है। झटकों और घूमता द्वारा (चित्र 7.8)।

2. इसका पीएच एक पीएच पेपर या पीएच मीटर का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है और यदि यह कम है तो 0.1N HC1 का उपयोग करके 6.8 तक समायोजित किया जाता है या यदि यह 0.1N NaOH का उपयोग करता है। कुप्पी को गर्म किया जाता है, यदि आवश्यक हो, तो सामग्री को पूरी तरह से भंग करने के लिए।

3. शोरबा को पांच परीक्षण ट्यूबों (लगभग 10 मिलीलीटर प्रत्येक) में वितरित किया जाता है।

4. एक डरहम ट्यूब को प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में शोरबा में उल्टा स्थिति में रखा जाता है। डरहम ट्यूबों में हवा होती है और तैरती है। नसबंदी के दौरान, गर्म भाप इस हवा को विस्थापित कर देती है, जिसके कारण वे शोरबा में डूब जाते हैं। इस प्रकार, उन्हें शोरबा में डूबा रखने के लिए नसबंदी से पहले शोरबा के साथ भरने से डरहम ट्यूबों के भीतर से हवा को हटाने की कोई आवश्यकता नहीं है।

5. परखनली सूती-प्लग वाली होती हैं, जिन्हें क्राफ्ट पेपर से ढका जाता है और धागे या रबर बैंड से बांधा जाता है।

6. शोरबा ट्यूबों को आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस (15 साई दबाव) पर निष्फल किया जाता है। वैकल्पिक रूप से, बेसल माध्यम (कार्बोहाइड्रेट के बिना मध्यम) का 90 मिलीलीटर आटोक्लेव में निष्फल होता है और इसके लिए, ठंडा होने के बाद, झिल्ली छानने से निष्फल कार्बोहाइड्रेट के 10 मिलीलीटर (10%) जोड़ा जाता है। यह गर्मी के प्रति संवेदनशील कार्बोहाइड्रेट के लिए विशेष रूप से आवश्यक है, जो गर्मी नसबंदी के दौरान गिरावट से गुजरता है।

7. शोरबा ट्यूबों को कमरे के तापमान तक ठंडा करने की अनुमति है।

8. परीक्षण बैक्टीरिया को असंगत रूप से टीका लगाया जाता है, अधिमानतः एक लामिना का प्रवाह कक्ष में, बन्सेन लौ के ऊपर निष्फल लूप की मदद से शोरबा में। लूप को प्रत्येक इनोक्यूलेशन के बाद निष्फल किया जाता है।

9. इनक्यूबेटेड शोरबा ट्यूबों को एक इनक्यूबेटर में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।